欢迎访问betway必威官网公司网站!


科学 / 生命科学

MENU

科学 / 生命科学

检测试剂盒,人可溶性肾素受体ELISA检验试剂盒

点击: 121 次  来源:http://www.010zws.com 时间:2020-02-25

核心提示:人可溶性肾素受体ELISA检测试剂盒日本IBL原装进口,货号:27782日本IBL中国独家代理商“深圳科润达生物工程有限公司”竭诚为您服务

核心提示:小鼠 CCL8/MCP-2 ELISA 检测试剂盒(日本IBL 进口原装货号:27773 规格:96T)

人可溶性肾素受体ELISA检测试剂盒日本IBL原装进口,货号:27782日本IBL中国独家代理商“深圳科润达生物工程有限公司”竭诚为您服务

小鼠 CCL8/MCP-2 ELISA 检测试剂盒(日本IBL 进口原装货号:27773 规格:96T)

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 简介 肾素受体是肾素和肾素前体的共同受体.当肾素与其受体结合后, 肾素作用于全身循环及局部组织中的血管紧张素,使其变成血管紧张素1,另外肾素受体受刺激后会激活细胞内的信号通道.公认地对RR的研究对抑制过度活跃的肾素-血管紧缩素-醛固酮系统提供重要的研究方略.RR是一种分子量为39 kDa的单跨膜受体蛋白.据报道其中的29 kDa的可溶性片段是由于RR的裂解而产生的.因此定量的检测血液或尿液中的可溶性RR可以作为检测发病新的辅助工具,作为解释其病理机制的新途径.此ELSIA检测试剂盒可以定量检测人血液和尿液中的可溶性肾素受体。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 实验原理日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 此试剂盒基于酶免法的夹心原理,利用两种高特异性抗体,TMB作为显色剂,显色的强度与人肾素受体的量成正比日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。检测范围日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 125~8000pg/ml日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 预期用途日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 仅用于研究,不能用于诊断此试剂盒可用于血清,EDTA-血浆,尿液和细胞培养上清液中人肾素受体的定量检测日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。试剂盒组成日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。

简介趋化因子配体8/单核细胞趋化因子2由97个氨基酸组成,属于C-C亚族.CCL8/MCP-2由单核细胞,纤维母细胞和上皮细胞产生,对CD4+ T细胞,CD8+ T细胞和NK细胞具有趋化活性.尽管CCL8/MCP-2在小鼠体内的生物活性仍存在未知之数,但近期有报告表明,血浆中CCL8/MCP-2浓度上升与移植物抗宿主病的发病有密切联系,这种病症是一种骨髓移植并发症,并且研究表明CCL8/MCP-2与小鼠机体内的免疫反应息息相关.实验原理此试剂盒是一种夹心法的酶联免疫吸附测定试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与小鼠样品中CCL8/MCP-2的量成正比检测范围78.13 ~5,000 pg/mL预期用途仅用于研究,不可用于诊断此试剂盒可用于小鼠血清,EDTA血浆和肝素血浆中CCL8/MCP-的定量检测试剂盒成分

  1. 预包被板,抗人肾素受体兔IgG,亲和纯化 96孔
  2. 标记抗体浓缩液,
  1. 包被板,包被了抗小鼠CCL8/MCP-2兔IgG 96孔
  2. 标记抗体,

30X,HRP标记抗人肾素受体小鼠IgGFab’ 0.4mlx1

30X浓缩,HRP标记抗小鼠CCL8/MCP-2兔IgG单抗,Fab'亲合纯化 0.4ml x 1

  1. 标准品,重组人肾素受体 0.5mlx2
  2. EIA缓冲液,1%BSA,含0.05%吐温20的PBS 30mlx1
  3. 标记抗体稀释液,1%BSA,含0.05%吐温20的PBS 12mlx1
  4. 着色剂,TMB底物液 15mlx1
  5. 终止液,1N硫酸 12mlx1
  6. 洗涤缓冲浓缩液,40X,含0.05%吐温20的磷酸缓冲液 50mlx1
  1. 标准品,重组小鼠CCL8/MCP-2 0.5mlx 2
  2. EIA缓冲液,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS 30mlx 1
  3. 标记抗体稀释液,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS 12mlx 1
  4. 显色剂,TMB, 15mlx 1
  5. 终止液,1N硫酸, 12mlx 1
  6. 洗涤缓冲浓缩液,40X浓缩,0.005%吐温20的磷酸缓冲液 50mlx 1

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。实验所需材料但试剂盒未提供日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。

实验所需材料但试剂盒未提供酶标仪 移液器和枪头带刻度的量筒和烧杯 去离子水冰箱 坐标纸吸水纸 标准品稀释试管保温箱(37±1℃) 洗瓶一次性试管试剂准备

  1. 酶标仪
  2. 微移液管和枪头
  3. 烧杯
  4. 去离子水
  5. 冰箱
  6. 坐标纸
  7. 吸水纸
  8. 用于稀释标准品的试管
  9. 洗瓶
  10. 一次性试验管
  1. 洗涤缓冲液制备:试剂盒的洗涤液为40倍浓缩,使用前,先将洗涤浓缩液平衡至室温,充分混匀,然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀,即得。配制的稀释洗涤液应保存于冰箱内,并于2周内用完
  2. 稀释标记抗体的制备:用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍,即得。

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。试剂准备日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。

例:如果只测一条板,8孔,则需要标记抗体800ul(30ul的浓缩标记抗体+870ul的标记抗体稀释液,混匀,使用时每孔加100ul)此步骤在实验开始前完成剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内,保存在4℃

  1. 洗涤缓冲液制备:先将洗涤浓缩液平衡至室温,充分混匀,然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀,即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内,并于2周内用完
  2. 标记抗体的制备:用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍,即得。
  1. 标准品的制备:吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内,充分混匀,得到浓度为10,000 pg/mL的小鼠CCL8/MCP-2标准品
  2. 标准品的稀释:准备8个试管用于标准品的稀释,每管加入230ul的EIA缓冲液

如:如果只测一条板,8孔,则需要标记抗体800ul(30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液,混匀,使用时每孔加100ul)此步骤在实验前完成剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内,保存在4℃

每管的浓度如下1号管 5,000 pg/mL2号管 2,500 pg/mL3号管 1,250 pg/mL4号管 625 pg/mL5号管 312.5 pg/mL6号管 156.25 pg/mL7号管 78.13 pg/mL8号管 0ng/ml吸取230ul的浓度为10,000 pg/mL的标准品至1号管混匀,然后从1号管吸取230ul加入2号管,依次连续稀释,标准品范围为78.13-5,000 pg/mL .8号管为浓度为0 pg/mL图片 1

  1. 标准品的制备:吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内,充分混匀,得到1600pg/ml的人肾素受体标准品
  2. 标准品的稀释:准备8个试管用于标准品的稀释,每管加入230ul的EIA缓冲液

试剂

每管的浓度如下1号管 8000pg/ml2号管 4000 pg/ml3号管 2000 pg/ml4号管 1000 pg/ml5号管 500 pg/ml6号管 250 pg/ml7号管 125 pg/ml8号管 0ng/ml吸取230ul的标准品于1号管混匀,然后从1号管吸取230ul加入2号管,依次连续稀释,标准品范围为8000~125 pg/ml

样品

  1. 样品稀释:样品用EIA缓冲液稀释。如果样品浓度未知,建议稀释几个不同比例的样品进行检测,来确定样品最佳稀释比例

标准品

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。实验步骤日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 使用前,所有样品应平衡至室温,大约30min,然后充分混匀,确保试剂质量无变化,标准曲线和样品检测同时进行

样品空白

试剂

试剂空白

检测样品

检测样品100ul

标准品

稀释标准品100ul

检测样品对照孔

EIA缓冲液100ul

试剂对照孔

EIA缓冲液100ul

检测样品100ul

盖板,37℃下温育60min

稀释标准品100ul

洗板7次

EIA缓冲液100ul

酶标抗体

EIA缓冲液100ul

100ul

盖板,4℃下孵育过夜

100ul

洗板4次

100ul

酶标抗体

-

100ul

盖板,4℃下温育30min

100ul

洗板9次

100ul

显色剂

-

100ul

盖板,4℃下温育60min

100ul

洗板5次

100ul

显色剂

100ul

100ul

室温避光温育30min

100ul

终止液

100ul

100ul

100ul

100ul

室温避光温育30min

100ul

终止液

100ul

100ul

加终止液后30min内于450nm处读取OD值

100ul

  • 设试剂空白对照孔,并在相应的微孔中加入100ul EIA缓冲液。
  • 确定好样品空白孔,样品孔和标准品孔,然后分别将100ul样品空白、检测样品和稀释好的标准品加入到相应的微孔中。
  • 盖板,37℃下温育60min
  • 用洗瓶剧烈洗板,再在微孔中加入洗涤液静置15-30秒,洒弃洗涤液。重复7次,最后在吸水纸上拍干

100ul

如果用自动洗板机洗板,先自动洗板4次,再按上述手动洗板3次

100ul

  • 每孔加100ul稀释标记抗体,除试剂空白对照孔外
  • 盖板,4℃下温育60min
  • 按照步骤4)洗板9次
  • 取所需量的显色剂加入到试管中,然后在每一微孔中加入100ul显色剂。

加终止液后,30min内于酶标仪450nm处读取OD值

为了避免污染,请勿将剩余试剂在倒入原装试剂瓶中。

  1. 确定试剂空白孔并加入100 μL EIA缓冲液
  2. 各加加100ul试验样品空白,样品和稀释的标准品至相应的孔内
  3. 盖板,4℃下孵育过夜
  4. 洗板,重复4次以上,吸水纸上拍干
  5. 每孔加入100ul的标记抗体液,除试剂空白孔外
  6. 盖板,4℃下孵育60min
  7. 洗板5次,同步骤四
  8. 吸取试验所需的TMB底物液于一次性试管内,每孔加入100ul的TMB底物液。剩余的TMB底物液不能再放回至原装瓶内
  9. 黑暗处,室温下孵育30min,溶液变蓝
  10. 每孔加入100ul的终止液,溶液变蓝
  11. 擦去微孔板底部的污点或水滴,终止液加入后30min内,在酶标仪450nm处读数
  • 室温避光温育30min,加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色
  • 在每孔加100ul终止液,轻敲板边混匀,此时溶液颜色会变成黄色
  • 擦去微孔板底部的污垢或水滴并确定反应液无气泡产生,加终止液后30min内在酶标仪450nm处读数

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。特别注意日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。

特别注意

  1. 试验样品采集后应立即检测或是冻存,冻存的样品避免反复冻融,检测前应在低温下先将其完全溶解混匀
  2. 试验样品用EIA缓冲液稀释,
  3. 试验样品和标准品应做双份检测
  4. 试验样品应在中性PH范围,有机溶剂的污染可能会影响检测
  5. 只能用试剂盒提供的洗涤液洗板,否则会导致试验失败
  6. 吸水纸上拍干微孔板,不能擦拭
  7. TMB底物液应贮存于黑暗处,因其对光敏感,且避免接触金属
  8. 加入终止液后30min内必须酶标仪读数
  1. 试验样品采集后应立即检测或是冻存,冻存的样品避免反复冻融,检测前应在低温下先将其完全溶解混匀
  2. 试验样品用EIA缓冲液稀释
  3. 试验样品和标准品建议做双份检测
  4. 试验样品应在中性PH范围,有机溶剂的污染可能会影响检测结果
  5. 只能用试剂盒提供的洗涤液洗板,不充足或过多的洗涤会导致试验失败
  6. 吸水纸上拍干微孔板,不能擦拭
  7. TMB底物液应贮存于黑暗处,因其对光敏感,且避免接触金属
  8. 加入终止液后30min内必须于酶标仪读数

日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。结果计算日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 绘制曲线前,所有的数据都应减去试验样品空白值,包括标准品和未知的样品。以标准品的OD值和浓度在对数-对数坐标纸上绘制标准曲线,从标准曲线上可直接读取未知样品的浓度附:采用全自动酶标仪检测,只需检测前设置好酶标仪的相关参数,如坐标参数和计算方式参数(三次回归、四参数或双对数曲线方程),即可直接得到结果日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 日本IBL中国独家代理,人可溶性肾素受体ELISA试剂盒。 本译文仅供参考,详情请以原文为准。 中国独家总代理:深圳市科润达生物工程有限公司 公司地址 :深圳市坪山区坑梓街道中兴路14号中城生命科学园第一分园A栋301B邮编 :518122联系电话 :0755-26814430传真 :+86 755 26814431免费订货电话 :800-8306296。技术咨询 :座机,0755-26680196;手机,15711973608;E-mail,kerunda@szonline.net 。官方网址 :www.kerunda.com.cn欢迎索取详细资料,在线Email:kerunda_tech@163.com

结果计算绘制曲线前,所有的数据都应减去试验样品空白值,包括标准品和未知的样品。以标准品的OD值和浓度在对数-对数坐标纸上绘制标准曲线,从标准曲线上可直接读取未知样品的浓度图片 2